Рођен у Листри Ликаонској од оца Грка и мајке Јеврејке. Мајку и бабу му је похвалио Свети Апостол Павле због вере нелицемерне. У Листри се Тимотеј срео први пут са великим апостолом и сам је био сведок када је Павле исцелио хромог од рођења.
Касније је Тимотеј био безмало сталан сапутник Павлов, обишао је са њим Ахају, Македонију, Италију и Шпанију. Велики проповедник вере и изврстан беседник, Тимотеј је много допринео распрострањењу и утврђењу хришћанске вере.
Верује се да је стигао и до наших простора, а пре свега до Сингидунума (данашњег Београда) по коме је ширио хришћанство. Предање каже да је управо овај светитељ био први који је данашњу српску престоницу прогласио за "хришћански град".
По мученичкој смрти Павловој Тимотеј је имао за учитеља светог Јована Јеванђелиста, али када је овог Цар Дометијан прогнао из Ефеса на острво Патмос, Тимотеј је остао у Ефесу да епископује.
У време неког идолског празника званог Катагогиум, незнабошци, кивни на хришћане, мучки и под маскама напали су Тимотеја и убили га (око 93. године). Часне мошти његове касније су пренете у Цариград и сахрањене у цркви Светих Апостола, до гроба светог Луке Јеванђелиста и светог Андреја Првозваног.
Свети апостол Тимотеј сматра се заштитником добрих и праведних говорника, као и разумних људи. Легенда каже да никада није подигао глас већ да је увек говорио тихо и са уважавањем онога са којим прича - био то пријатељ или непријатељ.
Зато, нема разлога да се данас плашите својих противника. Замолите Светог апостола Тимотеја за помоћ и имаћете Бога на својој страни па ће и свака невоља бити превазиђена.